Laboratorio di Tecniche separative e interazioni di affinità
Macroarea di ricerca: Analisi Farmaceutica
Settori ERC: PE5_18 Medicinal Chemistry, PE4_5 Analytical Chemistry, PE5_6 New materials: oxides, alloys, composite, organic-inorganic hybrid, nanoparticles, PE11_9 Nanomaterials engineering, e.g. nanoparticles, nanoporous materials, 1D & 2D nanomaterials, LS7_3 Nanomedicine, LS7_2 Medical technologies and tools (including genetic tools and biomarkers) for prevention, diagnosis, monitoring and treatment of diseases
- Referenti: Ersilia De Lorenzi (PO), Massimo Serra (PTA)
- Junior Staff: Cecilia Contardi (Dottoranda)
1. CARATTERIZZAZIONE DI NANOPARTICELLE POLIMERICHE
I Molecularly Imprinted polymers (MIPs) sono progettati in-house per rivelare biomarker tumorali altrimenti inaccessibili o per scoprire nuovi biomarker di malattie. I MIPs sono caratterizzati durante la progettazione e lo sviluppo per ottenere materiali ottimizzati e riproducibili. La caratterizzazione dei MIPs in diversi formati, tra cui le nanoparticelle, viene eseguita mediante elettroforesi capillare (CE), cromatografia liquida (LC), light scattering dinamico, potenziale zeta, microscopio a forza atomica. Studi di interazione templato-MIP si realizzano mediante CE di affinità (dynamic complexation CE, frontal CE) and LC frontale.
2. ANALISI E CARATTERIZZAZIONE DI PROTEINE
Tecniche analitiche e spettroscopiche avanzate vengono impiegate per la separazione, identificazione, caratterizzazione e quantificazione di proteine (varianti di carica, conformeri del folding e/o aggregati). In particolare vengono studiate proteine di interesse patologico o terapeutico, come le proteine amiloidogeniche, che possono essere bersagli di farmaci.
3. DA STUDI DI AFFINITA’ AL DRUG DISCOVERY
Strategie integrate per correlare lo stato di aggregazione, la struttura e la tossicità di oligomeri del peptide Aß 1-42 quali bersagli di farmaci (elettroforesi capillare, ATR-FTIR, TEM, simulazioni in silico, test biologici su linee cellulari). Valutazioni di nuovi analoghi della curcumina quali potenziali agenti terapeutici per la Malattia di Alzheimer. L’attività anti-oligomerica, anti-fibrillogenica, anti-infiammatoria, anti-ossidante viene studiata su linee cellulari e cellule neuronali primarie.
- Groves, K. et al: REFERENCE PROTOCOL TO ASSESS ANALYTICAL PERFORMANCE OF HIGHER ORDER STRUCTURAL ANALYSIS MEASUREMENTS: RESULTS FROM AN INTERLABORATORY COMPARISON (2021) Analytical Chemistry, 93(26), pp. 9041-9048
- Bisceglia, F. et al: PRENYLATED CURCUMIN ANALOGUES AS MULTIPOTENT TOOLS TO TACKLE ALZHEIMER'S DISEASE (2019) ACS Chemical Neuroscience, ACS Chemical Neuroscience, 10(3), pp. 1420-1433
- Bisceglia, F. et al: AN INTEGRATED STRATEGY TO CORRELATE AGGREGATION STATE, STRUCTURE AND TOXICITY OF Aß 1–42 OLIGOMERS (2018) Talanta, 188, pp. 17-26
- De Lorenzi, E. et al: EVIDENCE THAT THE HUMAN INNATE IMMUNE PEPTIDE LL-37 MAY BE A BINDING PARTNER OF AMYLOID-Β AND INHIBITOR OF FIBRIL ASSEMBLY (2017) Journal of Alzheimer's Disease, 59(4), pp. 1213-122
- Bertoletti, L. et al: EVALUATION OF CAPILLARY ELECTROPHORESIS-MASS SPECTROMETRY FOR THE ANALYSIS OF THE CONFORMATIONAL HETEROGENEITY OF INTACT PROTEINS USING BETA2-MICROGLOBULIN AS MODEL COMPOUND (2016) Analytica Chimica Acta, 945, pp. 102-109
- Bertoletti, L. et al: CAPILLARY ELECTROPHORESIS ANALYSIS OF DIFFERENT VARIANTS OF THE AMYLOIDOGENIC PROTEIN Β2-MICROGLOBULIN AS A SIMPLE TOOL FOR MISFOLDING AND STABILITY STUDIES (2015) Electrophoresis, 36(19), pp. 2465-2472
- Bertoletti, L. et al: ADVANCED GLYCATION END PRODUCTS OF BETA2-MICROGLOBULIN IN UREMIC PATIENTS AS DETERMINED BY HIGH RESOLUTION MASS SPECTROMETRY (2014) Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 91, pp. 193-201
- Brogi, S. et al: DISEASE-MODIFYING ANTI-ALZHEIMER'S DRUGS: INHIBITORS OF HUMAN CHOLINESTERASES INTERFERING WITH Β-AMYLOID AGGREGATION (2014) CNS Neuroscience and Therapeutics, 20(7), pp. 624-632
- Butini, S. et al.: MULTIFUNCTIONAL CHOLINESTERASE AND AMYLOID BETA FIBRILLIZATION MODULATORS. SYNTHESIS AND BIOLOGICAL INVESTIGATION (2013) ACS Medicinal Chemistry Letters, 4(12), pp. 1178-1182
- Bertoletti,L. et al.: SEPARATION AND CHARACTERISATION OF BETA2-MICROGLOBULIN FOLDING CONFORMERS BY ION-EXCHANGE LIQUID CHROMATOGRAPHY AND ION-EXCHANGE LIQUID CHROMATOGRAPHY-MASS SPECTROMETRY (2013) Analytica Chimica Acta, 771, pp. 108-114
Collaborazioni Nazionali
ISTITUZIONI ACCADEMICHE
Bice Conti, Rossella Dorati, Cristina Lanni, Department of Drug Sciences, University of Pavia
Maddalena Patrini, Department of Physics, University of Pavia
Morena Zusso, Department of Pharmaceutical and Pharmacological Sciences,University of Padova
Federica Belluti, Department of Pharmacy and Biotechnology, University of Bologna
Giulio Vistoli, Department of Pharmaceutical Sciences,University of Milano Statale
Sofia Giorgetti, Department of Molecular Medicine, University of Pavia
Antonino Natalello, Department of Biotechnology and Biosciences, University of Milano Bicocca
Laura Verga, IRCCS Policlinico San Matteo, Pavia
Marcella Chiari, Institute of Chemistry of Molecular Recognition, CNR, Milano
Carlo Morasso, Istituto Neurologico Mondino, Pavia
INDUSTRIA
Indena SpA, Settala (MI)
Merck-Serono, Guidonia (RM)
Collaborazioni Internazionali
ISTITUZIONI ACCADEMICHE
Börje Sellergren, University of Malmö, Sweden
Ian Nicholls, University of Linnaeus, Sweden
Knut Rurack, Federal Institute for Materials Research and Testing
Panagiotis Manesiotis, Queen’s University, Belfast, United Kingdom
Annelise Barron, Stanford University, Stanford, CA, USA
INDUSTRIA
LGC Ltd.,Teddington, UK
Marie Skłodowska-Curie Actions (H2020-MSCA-ITN-2016, 722171-Biocapture)
- Competenze. Sviluppo e convalida di metodi analitici per piccole molecole e proteine mediante elettroforesi capillare (CE-UV), inclusi profili di varianti di carica di anticorpi e proteine PEGilate. Studi di fattibilità e ottimizzazione di metodi CE per l’uso routinario su DS e DP. Studi in soluzione di interazione farmaco-farmaco, farmaco-proteina, farmaco-nanoparticelle mediante CE di affinità. Analisi di nanoparticelle mediante CE. Sviluppo e convalida di metodi analitici per piccole molecole e proteine mediante HPLC-UV, HPLC-DAD. Studi di fattibilità e ottimizzazione di metodi HPLC per l’uso routinario su DS e DP.
- Strumentazione n. 2 CE (Agilent and Beckman) with DAD detector; n.2 HPLC (Agilent) with DAD detector; -n. 1 HPLC (Agilent) with UV-Vis detector